Родился 5 марта 1936 г. в дер. Васильковка (Днепропетровская область Украинской ССР, ныне поселок городского типа Васильковка, Украина) в семье Никиты Даниловича и Александры Прохоровны Маслаченко. Его отец работал ветеринарным врачом, мать вела домашнее хозяйство. Во время Великой Отечественной войны вместе с семьей находился в эвакуации на Северном Кавказе. Впоследствии учился в школе в г. Кривой Рог (Днепропетровская область Украинской ССР). Занимался баскетболом, волейболом, гимнастикой, настольным теннисом и другими видами спорта, однако в старших классах остановил свой выбор на футболе.
Владимир Маслаченко выступал на позиции вратаря. В начале 1950-х гг. играл за криворожские команды "Строитель" и "Спартак". В 1953 г. стал игроком команды "Металлург" (Днепропетровск; впоследствии команда носила название "Днепр", была расформирована в 2019 г.), получившей право выступать в классе "Б" чемпионата СССР. В 1954 г. клуб дошел до полуфинала Кубка страны. После этого успеха Маслаченко перешел в московский "Локомотив". В составе столичного клуба вратарь провел пять сезонов (1957-1961), выиграл Кубок СССР (1957) и серебро чемпионата страны (1959). В 1961 г. получил престижный приз "Вратарь года" от журнала "Огонек".
В 1962-1968 гг. Владимир Маслаченко выступал за московский "Спартак", с 1966 г. был капитаном команды. С этим клубом он выиграл чемпионат СССР (1962), дважды становился серебряным призером первенства страны (1963, 1968), два раза выигрывал Кубок СССР (1963, 1965).
Впервые получил приглашение в сборную страны в 1957 г., всего в 1960-1962 гг. провел за нее восемь официальных матчей. В 1960 г. во Франции стал чемпионом Европы (на поле не выходил, основным вратарем был Лев Яшин), также находился в составе сборной на чемпионатах мира 1958 (Швеция) и 1962 (Чили) гг.
В 1970 г. Владимир Маслаченко окончил Государственный центральный институт физической культуры (ныне Российский государственный университет физической культуры, спорта, молодежи и туризма), в 1971 г. - курсы французского языка при Московском государственном педагогическом институте иностранных языков им. Мориса Тореза (ныне Московский государственный лингвистический университет).
С начала 1970-х гг. на протяжении почти 40 лет Владимир Маслаченко работал спортивным журналистом (с перерывом в 1972-1973 гг., когда был тренером-координатором клубов и национальной сборной Республики Чад). До распада СССР выступал как комментатор и спортивный обозреватель на Всесоюзном радио и Центральном телевидении (в т. ч. в программе "Время"). Впоследствии работал на НТВ, спортивных каналах "НТВ-Плюс", Первом канале, был одним из основателей русскоязычной версии канала "Евроспорт".
В 1992-1994 гг. занимал пост президента Федерации фристайла России.
Владимир Маслаченко скончался 28 ноября 2010 г. в Москве на 75-м году жизни. Похоронен на Ваганьковском кладбище.
Заслуженный мастер спорта СССР (1969).
Был награжден орденами "Знак Почета" (1980) и Дружбы (2007), медалью ордена "За заслуги перед Отечеством" II степени (1997).
Лауреат премии ТЭФИ в номинации "Спортивный комментатор, ведущий спортивной программы" (2000).
Был женат на Ольге Леонидовне Маслаченко (работала специалистом в области патентоведения). Сын - Валерий. Старшая внучка - Юлия Маслаченко - ведущая телеканала "Матч ТВ".