Родился 14 марта 1945 г. в поселке Уотерфол (округ Цгачас-Нек, Лесото).
В 1970 г. окончил Университет Ботсваны, Лесото и Свазиленда, получив степень бакалавра. В 1976 г. защитил магистерскую диссертацию по лингвистике в Университете Висконсин-Мэдисон (США). В 1978 г. окончил дистанционную форму бакалавриата Университета Южной Африки (Претория, ЮАР), а в 1982 г. - защитил магистерскую диссертацию по педагогике в Университете Симона Фрейзера (Канада).
В 1967 г. Мосисили вступил в ряды оппозиционной Партии конгресса басуто (ПКБ). ПКБ придерживалась идеологии панафриканизма и, заявляя о солидарности с борцами против апартеида в ЮАР, выступала против консервативного политического курса правительства Леабуа Джонатана. На парламентских выборах 1970 г. ей удалось одержать победу над правящей Национальной партией басуто. Однако внутренний раскол в партии, последовавший сразу же за оглашением итогов выборов, спровоцировал политический кризис в стране и позволил Джонатану вернуть себе власть, совершив государственный переворот. В ответ на узурпацию власти, приостановку действия конституции и запрет политических партий ПКБ перешла к активному сопротивлению, включавшему в себя и элементы вооруженной борьбы – диверсии и нападения на политиков правящего режима. Власть ответила репрессиями против активистов. В числе политзаключенных в июле 1970 г. оказался и Мосисили, содержавшийся под стражей до ноября 1971 г.
В последующие годы Мосисили продолжал образование, совмещая с работой преподавателя африканских языков в университетах Ботсваны, Лесото и Свазиленда (1973-1976), Национальном университете Лесото (1976-1983), Фортхарском (ЮАР, 1983-1984), Транскея (ЮАР, 1985-1988), Зулуленда (ЮАР, 1989-1992).
В 1993 г. в Лесото были проведены парламентские выборы, по итогам которых ПКБ заняла все 65 мест в Национальной ассамблее. Мосисили также был избран депутатом и получил в правительстве пост министра образования, культуры, спорта и по делам молодежи. В январе 1995 г. он был также назначен вице-премьером правительства, сохранив свой портфель, а в июле того же года - переведен на должность министра внутренних дел и местной администрации.
В 1997 г. очередной раскол в ПКБ привел к выходу из партии премьер-министра Нцу Мохехле и его сторонников, основавших новую партию Конгресс Лесото за демократию (КЛД). Сторонникам Мохехле, в числе которых оказался и Мосисили, удалось сохранить большинство в парламенте и контроль над правительством. В феврале 1998 г. Мохехле в связи с ухудшением состояния здоровья объявил об окончании политической карьеры и Мосисили был избран новым лидером КЛД. В мае 1998 г. КЛД одержал победу на очередных выборах, а Мосисили возглавил правительство. Однако оппозиция отказалась признать итоги голосования и призвала своих сторонников к акциям протеста. В августе в столице Масеру демонстрации оппозиции переросли в массовые беспорядки, в сентябре – начались волнения в рядах вооруженных сил. Избирательная комиссия Лесото согласилась на пересчет голосов. В то же время по просьбе Мосисили в страну вступили отряды армий ЮАР и Ботсваны, однако недовольные решением премьер-министра военные части Лесото начали оказывать им вооруженное сопротивление. Политический кризис удалось разрешить путем переговоров с участием международных наблюдателей из стран-членов Сообщества развития Юга Африки (САДК). В соответствии с достигнутыми на них договоренностями Мосисили остался главой правительства на переходный период до проведения новых внеочередных парламентских выборов в течение двух лет. Впоследствии они были отложены до 2002 г.
По результатам выборов 2002 и 2007 гг. КЛД получал парламентское большинство, а Мосисили занимал кресло премьер-министра до 2012 г.
На предвыборном съезде КЛД в январе 2012 г. партия раскололась на сторонников Мосисили и генерального секретаря Мотетжоа Метсинга. После того, как съезд выдвинул кандидатом в премьер-министры Метсинга, Мосисили и его сторонники вышли из КЛД и создали новую партию Демократический конгресс (ДК). По итогам состоявшихся в мае выборов ДК получил относительное большинство в парламенте, однако не смог составить правящую коалицию и в итоге занял место в оппозиции. Однако коалиция трех партий во главе с премьер-министром Томасом Табане и вице-премьером Метсингом раскололась уже к июню 2014 г. 30 июня Национальная ассамблея была распущена указом Табане, а спустя два месяца сам премьер-министр покинул страну, обвинив руководство армии в попытке осуществления военного переворота. Для урегулирования политического кризиса вновь потребовалось вмешательство международных посредников, убедивших стороны конфликта пойти на проведение досрочных выборов.
В составе парламента, избранном 28 февраля 2015 г., ДК вновь занял относительное большинство, проведя в него 47 из 120 депутатов. На этот раз руководству партии удалось составить коалицию с КЛД и еще пятью мелкими партиями и сформировать правительство. Пакалита Мосисили вновь занял пост премьер-министр Лесото.
1 марта 2017 г. четыре парламентские партии ("Конвент всех басуто", "Альянс демократов", Национальная партия басуто и "Реформированный конгресс Лесото") вынесли правительству Мосисили вотум недоверия. В соответствии с конституцией, перед премьер-министром стоял выбор: уйти в отставку или рекомендовать королю распустить парламент. Он выбрал второе. 7 марта парламент был распущен. 13 марта было объявлено о назначении досрочных выборов в предусмотренный конституцией трехмесячный срок. На выборах 3 июня партия Мосисили заняла второе место, получив 30 мест в парламенте.
8 июня 2017 г. Мосисили подал королю прошение об отставке.
Женат на Матато Мосисили, имеет с ней двух сыновей и двух дочерей.
Увлечения: садоводство, животноводство, наука, спорт, музыка.